左旋内酯水解酶的克隆表达与纯化
本文首次详细研究了这段全长1206bp(其中前60对碱基编码信号肽)的基因(GeneBank登记号EU596535),并将该基因在E.coli JM 109/pET-28a表达系统中进行了高效表达(478 U/g湿细胞),重组酶的分子量约50kDa。利用pET-28a载体上的6个组氨酸标签,经过镍柱螯合层析后,该重组蛋白于500mM咪唑溶液洗脱下获得了单一的条带。通过内酯拆分实验,发现该重组酶的选择性有所提高,在转化率达到49.2%的时候,获得d-泛内酯的ee值为89.7%,l-泛内酯的ee值为94.9%。
左旋内酯水解酶 克隆表达 结构特征 重组酶
陈兵 范立强 赵健 张仙 许建和
华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室生物催化与加工研究室,上海200237
国内会议
西安
中文
1017-1017
2008-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)