单胞菌zjwp-14中L-ATC水解酶基因的克隆和表达
构建能高效表达L-ATC水解酶的重组菌。用PCR方法扩增假单胞菌zjwp-14中L-ATC水解酶基因片段,将该DNA片段插入T载体上测序得到522bp的DNA序列;将此序列插入表达载体pET-28a(+)上,转入大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,重组菌在0.5mmol/LIPTG诱导5h后,SDS-PAGE电泳检测重组蛋白分子量为20.3kD。所构建的表达菌株用于转化DL-ATC,以DTNB法检测转化率达83.65%。L-ATC水解酶在大肠杆菌中实现了高效表达,获得了具有生物转化活性的L-ATC水解酶重组蛋白。
水解酶 基因克隆 蛋白表达 生物转化
吴敏 陈蔚青 王普 何军邀 尹江峰
浙江工业大学生物制药研究所,浙江杭州310032 浙江树人大学生物与环境学院,浙江杭州310015
国内会议
西安
中文
1152-1152
2008-10-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)