采用含表头设计的正交表优化款冬ISSR反应体系

摘要：

　　目的：建立一个稳定性高、重复性好适用于款冬(Tussilago farfara L.)的ISSR反应的体系,分析ISSR反应体系中各因素及各因素间交互作用对反应体系的影响,为ISSR标记技术在款冬遗传多样性研究中的应用奠定技术基础。方法：确定款冬ISSR初始反应体系并对引物进行初筛,采用含交互作用正交试验设计的方法,从Mg2+、dNTP、TaqDNA聚合酶和引物浓度4因素3水平,并考虑Mg2+和 TaqDNA聚合酶、Mg2+和dNTP、Mg2+和引物、Taq DNA聚合酶和dNTP、dNTP和引物交互作用的情况下,对款冬花ISSR-PCR反应体系进行优化分析,在此基础上筛选了最佳循环次数和最佳退火温度.结论：反应体系各因素中，Mg2+的浓度对ISSR-PCR反应影响最为明显，同时，Mg2+和Taq DNA聚合酶、dNTP和引物的交互作用对反应体系有着显著影响，在体系建立过程中应优先考虑上述因素和交互作用；通过ISSR-PCR最佳反应体系和最佳扩增程序的验证，发现该反应体系和扩增程序具有较高的稳定性和较好的重复性，适用于款冬的ISSR扩增，为款冬的遗传多样性研究打下坚实基础。

关键词： 款冬 遗传多样性 ISSR反应体系 正交设计 交互作用

作者: LI Xiao-wei 李晓伟 HE Pan 何盼 ZHANG Yun-na 张允娜 ZHANG Fu-sheng 张福生

作者单位: Modern Research Center for Traditional Chinese Medicine,Shanxi University,Taiyuan 030006,China;Schoo 山西大学中医药现代研究中心,山西 太原 030006;山西大学化学化工学院,山西 太原 030006 Modern Research Center for Traditional Chinese Medicine,Shanxi University,Taiyuan 030006,China 山西大学中医药现代研究中心,山西 太原 030006

会议类型: 国内会议

会议名称: 第六届中国民族植物学学术研讨会暨第五届亚太民族植物学论坛

会议地点: 银川

会议语种:中文

页码: 6-7

在线出版日期: 2012-08-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）