BAFF转基因斑马鱼的构建
目的：体外克隆斑马鱼BAFF基因并构建pEGFP-C1-BAFF、pEGFP-N1-BAFF、pIRES2-EGFP-BAFF重组质粒,通过斑马鱼胚胎显微注射过表达BAFF重组质粒以构建SLE转基因斑马鱼疾病模型。方法：通过RT-PCR法由斑马鱼脾脏克隆了斑马鱼BAFF基因全长807bp蛋白编码区域,分别构建了BAFF过表达载体pEGFP-C1-BAFF,pEGFP-N1-BAFF及pIRES2-EGFP-BAFF重组质粒,通过斑马鱼胚胎显微注射过表达载体,体外细胞转染并通过免疫印迹法验证蛋白表达后对胚胎进行显微注射,通过GFP荧光跟踪并筛选阳性鱼。结果：通过体外细胞转染实验与免疫印迹法验证了pEGFP-C1-BAFF,pEGFP-N1-BAFF转染后细胞BAFF-GFP融合蛋白的成功表达,通过斑马鱼胚胎显微注射与荧光筛选,成功获得了过表达BAFF基因的转基因斑马鱼。结论：本文所构建pEGFP-C1-BAFF、pEGFP-N1BAFF、pIRES2-EGFP-BAFF重组质粒均可通过显微注射获得过表达BAFF的阳性转基因斑马鱼,为进一步研究自身免疫疾病相关疾病及生产SLE转基因斑马鱼疾病模型的奠定了基础。
系统性红斑狼疮 动物模型 基因表达 B细胞活化因子
张力 谢英 刘树锋
河北医科大学 河北省实验动物重点实验室 石家庄
国内会议
长春
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22-27
2012-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）