9HBV X基因转染L02细胞及其蛋白产物对CⅡTA和HLA-DR表达的影响
目的：探讨脂质体和电穿孔法在HBV X基因转染L02细胞中的差别及X基因蛋白产物对CⅡTA和HLA-DR表达的影响。方法：构建HBV X基因重组表达质粒,通过电穿孔和脂质体法转染人正常肝细胞L02细胞,以绿色荧光蛋白(enhance green fluorescent protein,EGFP)表达水平评价转染效率,流式细胞技术检测L02细胞HBV X蛋白的表达水平.RT-PCR、流式细胞技术及western-blot分析L02细胞、转染空载体以及转染HBV X基因重组表达质粒的L02细胞CⅡTA和HLA-DR的表达差别.结果：采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000的转染效率为(6.4±3.5)％,显著低于电穿孔法(41.46±5.8)％,P＜0.01.脂质体法转染的L02细胞HBVX蛋白表达水平为(5.1±3.9)％,显著低于电穿孔方法(37.5±4.1)％表达,P＜O.01.转染了HBVX基因重组表达质粒的L02细胞检测到CⅡTA和HLA-DR mRNA和蛋白表达,而L02细胞本身及转染空载体的L02细胞未检测到CⅡTA和HLA-DR的表达.结论：HBV X基因真核表达载体pHBx-IRES2-EGFP通过电穿孔法转染L02细胞较脂质体法有明显较高的转染效率和更高的目的基因的表达,HBV X基因诱导了L02细胞中CⅡTA和HLA-DR的表达.
乙肝病毒 基因转染 蛋白表达 临床应用
Zhang Qing 张卿 Li Jungang 李俊刚 Liu Yuyuan 刘玉元 Zhao Bo 赵博 Zhang Xuqing 张绪清
Department of Infectious Diseases,Southwest Hospital,Third Military Medical University,Chongqing,400 第三军医大学西南医院全军感染病研究所
国内会议
重庆
中文
183-191
2012-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）