人类精子在液氮和液氮蒸汽中冷冻储存的比较性研究
目的：比较人类冷冻精子在液氮和液氮蒸汽中的储存效果.对人类精液标本采用液氮和液氮蒸汽两种方法进行冷冻储存,主要观察：1.不同冷冻储存方法对前向运动精子比率、畸形率、DNA完整性等的影响.2.冷冻储存不同时间对前向运动精子比率、畸形率、DNA完整性等的影响.方法：山东省人类精子库中随机选取正常精液质量样标本48例.全部标本均来自体检合格捐献精子的志愿者,取精前志愿者禁欲3～7d,留取精液于无菌取精杯内,在培养箱中完全液化后,行精液常规检查.留取少量精液用于检测冻前指标,其余精液用于检测冻后指标.将精液与等量的冷冻保护剂充分混匀后,在室温下静置10min后进行相应步骤的静态的蒸汽冷冻,一部分标本直接投到液氮中(-196℃),另外的储存在液氮蒸汽罐中(-167℃).分别在不同时期进行复苏.主要检测指标：用Makler计数板人工检测前向运动精子比率,采用精子形态学快速染色(Diff-Quik法)试剂盒检测精子的畸形率,荧光染料吖啶橙标记精子DNA,荧光显微镜下检测精子DNA损伤.结果：与液氮相比较,储存于液氮蒸汽中的冷冻精子复苏后前向运动精子比率、畸形率和DNA完整性等没有明显区别(P＞0.05).两组中,随着冷冻储存时间的推移,前向运动精子比率、畸形率和DNA完整性等呈逐渐降低的趋势.液氮蒸汽中冷冻储存达180天时,上述指标皆有显著性差异(P＜0.05).结论：在液氮蒸汽中和液氮中冷冻储存人类精子的效果是一致的,前者可以取代液氮成为对精液标本长期储存的一种选择.液氮蒸汽冷冻储存精子时,应该尽量减少存储时间或者操作频率,减轻冷冻温差对精子的影响,最大可能的避免病原微生物的交叉污染.
人类精子 冷冻储存 液氮 比较分析法
胡京美 王丽 许成岩 宋晓辉 李斌 陈子江
山东大学附属生殖医院 山东济南250021
国内会议
中华医学会生殖医学分会人类精子库管理学组第三届年会暨全国男性生殖医学和精子库管理新进展第四次研讨会
深圳
中文
492-493
2012-09-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）