一株产耐高温嗜碱性酯酶菌株的筛选及基因克隆
本文从深圳福田红树林自然保护区土壤样品中分离纯化获得一株高酷酶活性的菌株，通过形态学和分子生物学初步鉴定该菌株为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)，命名为Bacillus sp.W77。为了获得菌株的酯酶基因，本研究通过pUC18质粒载体构建了较为完整的基因文库，通过酯酶的选择培养基初步筛选具有酯酶活性的转化子，发现在阳性克隆子中有7个产酯酶的阳性克隆子，本文选取了一个产水解圈最大且最快的克隆子pUC 18E 1-2进行测序研究，提交pUC 18E1-2的测序结果到GenBank，用ORF Finder查找测序结果的开放阅读框架。发现它含有一个比较大的开放读码框(ORF)，经测序比对，该片段内含一个由1470bp的片段，编码489个氨基酸，G+C含量49.5％，预测等电点为4.96，预测编码产物分子量约为54 kDa。同源性分析表明，该ORF与Bacillus subtilis subsp.subtilis str.168所产的对硝基苯酯酶有一定的同源性，该序列己经提交GenBank，登录号为JQ7017000。
微生物学 嗜碱性酯酶 菌株筛选 基因克隆
张敏文 刘悦 李荷
广东省生物活性药物研究重点实验室,广东药学院基础学院,广东,广州,510006
国内会议
济南
中文
24-24
2012-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）