链霉菌标签载体的构建及其应用
经过多年的研究，链霉菌遗传学己经取得了长足的发展，解析了大量基因的功能，但是在以研究蛋白质相互作用及蛋白质-DNA相互作用为基础的细胞内信号传导方面报道不多。本课题组以整合型启动子探针质粒pIJ8660为骨架，将EGFP编码序列改为多克隆位点，并在其前端插入了组成型强启动子ermEp*，以此为基础，通过密码子优化，将3FLAG, 3HA, 13Myc, 3Strep tagⅡ, 18His等标签蛋白编码序列分别插入到启动子下游，构建了一系列含单个标签或者两个标签的表达载体，并以天蓝色链霉菌中ECFσ因子SigT为模型，成功实现了表达。该系列载体的构建，为研究体内蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用打下了基础，并为在蛋白质组、基因组水平上通过串联亲和纯化(TAP)、ChIP-Seq方法筛选相关调控元件与调控靶点提供了有力工具。
链霉菌 标签载体 构建方法 基因表达
王月月 江辉 毛旭明 管文军 李永泉
浙江省杭州市浙江大学生命科学学院,310058
国内会议
济南
中文
32-32
2012-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）