没药提取物对成纤维细胞增殖与胶原mRNA表达的影响
目的：观察没药提取物对人皮肤Fb生物学特性的影响,探讨其促进创面愈合的可能机制。方法：(1)从人包皮组织分离培养正常Fb,取第3代细胞按随机数字表法分为对照组以及1×10-4、1×10-3、1×10-2、1×10-1、1×102、10、1g/L没药水提取物组与没药醇提取物组,对照组用含体积分数0.25％小牛血清的DMEM培养液(简称低浓度血清培养液)培养；各浓度没药水及没药醇提取物组,分别采用含相应终浓度2种没药提取物的低浓度血清培养液培养。培养48h,噻唑蓝法测定各组Fb增殖活性(以吸光度值表示),倒置相差显微镜观察细胞形态。(2)选用第3、4代Fb,分别接种到培养瓶和培养皿中,均按随机数字表法分为2组：1g/L没药水提取物组用含终浓度1g/L没药水提取物的低浓度血清培养液培养,对照组采用低浓度血清培养液培养。培养72 h,分别采用流式细胞仪、实时荧光定量RT-PCR法检测Fb周期与Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA的表达。对数据进行LSD-t检验。结果：(1)1×10-3、1×10-2、1×10-1、1、10 g/L没药水提取物组Fb吸光度值分别为0.378±0.032、0.402±0.007、0.390±0.038、0.453±0.036、0.390±0.037,均高于对照组的0.332±0.044,t值分别为2.24、2.93、2.69、5.73、2.71,P值均小于0.05；1×10-4、1×102g/L没药水提取物组吸光度值分别为0.312±0.048、0.154±0.009,前者略低于对照组(t=2.84,p＞0.05),后者显著低于对照组(t=7.17,p＜0.05)。1×10-3、1×10-1、1、10、1×102g/L没药醇提取物组Fb吸光度值低于对照组(t值为2.30～24.79,P值均小于0.05)。对照组、1g/L没药水提取物组细胞均呈长梭形生长,后者融合更显著。(2)1 g/L没药水提取物组G0/G1期细胞百分比为(74.3±6.3)％,明显少于对照组的(82.2±7.9)％,t=6.77,P＜0.05；S期及G2/M期细胞百分比分别为(16.6±3.4)％、(9.1±1.6)％,明显多于对照组的(13.3±2.3)％、(4.5±0.8)％,t值分别为7.53、6.34,P值均小于0.05.1g/L没药水提取物组Fb中Ⅰ型胶原mRNA相对表达量(0.89±0.08)低于对照组(1.00±0.06,t=1.17,P＞0.05),Ⅲ型胶原mRNA相对表达量(1.38±0.12)显著高于对照组(1.00±0.05,t=3.81,P＜0.01)。结论：没药水提取物能显著促进Fb增殖,加快Fb周期进程,同时可上调Ⅲ型胶原mRNA表达,可能为其促进创面愈合的机制。
没药提取物 成纤维细胞 伤口愈合 mRNA表达
BAI Xiao-zhi 白晓智 HU Da-hai 胡大海 BAI Li 白丽 LIU Yang 刘洋 SU Ying-jun 苏映军 TANG Chao-wu 汤朝武
Burn Center of PLA, Xijing Hospital, the Fourth Military Medical University, Xi”an 710032, P.R.China 第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科·全军烧伤中心 西安710032
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2012-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）