兔骨髓间充质干细胞的体外分离、培养及多向诱导分化
目的：建立一种分离、培养扩增兔骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的方法,观察体外培养中MSCs的生长特性,及其潜在的诱导分化能力。方法：取兔胫骨骨髓,密度梯度离心法联合贴壁培养法体外纯化扩增,相差显微镜观察其形态学特点,MTT法测定绘制传代MSCs生长曲线,经成骨诱导液(L-DMEN/F 12,10％ FBS,0.1 μmol/L地塞米松,50 μmol/L抗坏血酸,10 mmol/Lβ-甘油磷酸钠)、成脂诱导液(L-DMEN/F 12,10％ FBS,1μmol/L地塞米松,200μmol/L吲哚美辛,0.5mmol/L IBMX,10 μg/ml胰岛素)、成软骨诱导液(L-DMEN/F 12,10％ FBS,10 ng/ml TGF-β1,0.1μmol/L地塞米松,50 μmol/L抗坏血酸,6.25 μg/ml胰岛素)体外诱导MSCs向成骨细胞、脂肪细胞及软骨细胞分化,并分别经碱性磷酸酶染色、油红O染色和甲苯胺蓝染色法鉴定。结果：原代及传代MSCs为梭形。经成骨细胞诱导,细胞碱性磷酸酶染色阳性；经成脂肪细胞诱导,细胞内出现红色脂滴,经成软骨细胞诱导,甲苯胺蓝染色阳性。结论：通过密度梯度离心法联合贴壁培养法可在体外大量扩增、纯化MSCs,所获细胞具有高度自我更新能力和多向分化潜能,可用于进一步的实验研究。
间充质干细胞 体外分离 诱导分化 动物实验
XU Cheng-feng 徐成峰 HU Da-hai 胡大海 ZHAO Zhou-ting 赵周婷 ZHANG Wan-fu 张万福 BAI Xiao-zhi 白晓智 CAI Wei-xia 蔡维霞
Burns Center of PLA, Department of Burns and Cutaneous Surgery, Xijing Hospital, the Fourth Military 第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科·全军烧伤中心 西安710032
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2012-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）