搅拌式生物反应器培养促进拟胚体的形成及其向心肌细胞分化
目的：摸索搅拌式生物反应器培养小鼠胚胎干细胞(mESC)的最佳条件,建立一种批量制备拟胚体(EB)的方法。方法：研究mESC不同接种密度及生物反应器初始搅拌速度对EB形成的数量和质量的影响,以细菌培养皿中形成的EB为对照,用抗坏血酸诱导其向心肌细胞分化,比较两种培养体系对EB心肌细胞分化潜能的影响,通过免疫荧光染色及RT-PCR对ESC来源的心肌细胞进行鉴定。结果：当mESC接种密度为1～3×105个/ml,搅拌速度设定为15～30 rpm时,搅拌式生物反应器能高效制备出大量相对均一的EB,EB中几乎没有坏死细胞。与细菌培养皿制备的EB相比,生物反应器培养的EB向心肌细胞分化的效率更高,并表达心肌特异性基因。结论：搅拌式生物反应器培养促进EB的形成及其向心肌细胞分化,是一种更为理想的EB培养系统。
何文俊 付小兵
解放军总医院第一附属医院全军创伤修复与组织再生重点实验室 北京100048
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2012-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）