携带胰岛素基因的人脐带间充质干细胞与丝素蛋白构建组织工程脂肪的移植研究
目的 探讨携带重组人胰岛素(insulin)基因慢病毒载体转染的人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)与丝素蛋白复合后在Wistar大鼠体内构建组织工程脂肪的能力. 方法 分离培养hUCMSCs,将携带重组人胰岛素基因慢病毒载体以最适MOI=10转染hUCMSCs,将转染组与未转染基因的hUCMSCs(对照组)分别接种于丝素蛋白支架,在体外含10％ FBS的LG-DMEM培养基中孵育1-2d,在成脂诱导剂中孵育5-7d后,移植于Wistar大鼠背部皮下.移植后12周取材,行荧光原位杂交技术鉴定与组织形态学和扫描电镜观察.结果 1.两组新生组织油红O染色均呈阳性,证明新生组织为脂肪组织,且转染组脂肪样细胞数量明显高于对照组,有显著性统计学差异(P＜0.01).2.HE染色显示,两组新生组织结构与正常脂肪组织相似,组织内及其周围可见明显新生血管,未降解支架材料周围有炎性细胞浸润；转染组支架材料降解明显,炎性细胞浸润明显少于对照组,新生血管数量也多于对照组.3.扫描电镜观察,两组新生组织内可见脂肪样细胞和新生血管,转染组新生组织内脂肪样细胞聚集成团,其结构与正常脂肪组织相似；对照组脂肪样细胞则散在分布于支架孔隙内.结论 携带重组人胰岛素基因慢病毒载体转染的hUCMSCs与丝素蛋白支架复合后,在Wistar大鼠体内能构建出组织工程化脂肪组织,其结构类似正常脂肪组织.
组织工程脂肪 人脐带间充质干细胞 丝素蛋白 胰岛素 基因转染 慢病毒载体 移植
刘毅 唐军 徐斌
兰州军区兰州总医院全军烧伤整形外科中心 甘肃兰州730050
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217-217
2012-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）