骨髓间充质干细胞不同移植方式治疗大鼠糖尿病足溃疡的疗效观察
目的：评价骨髓间充质干细胞(bone-marrow derived mesenchymal stem cells,BM-MSCs)经创缘皮下和小腿肌肉移植对大鼠糖尿病足溃疡(diabetic foot ulcers,DFUs)的治疗效果。方法：全骨髓贴壁法体外培养雄性Wistar大鼠BM-MSCs至第三代,经4,6-联脒-2-苯基吲哚(4,6-diamino-2-phenylindole,DAPI)标记。48只雄性Wistar大鼠随机分成A组(BM-MSCs皮下移植组,n=12)、B组(BM-MSCs小腿肌肉移植组,n=12)、C组(正常足溃疡对照组,n=12)和D组(DFUs对照组,n=12)。大鼠糖尿病经腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱导,然后在其双后足背切取一3mm×7mm矩形全层皮肤制成大鼠DFUs模型。于移植后第2、5、8、11天评估各组大鼠的创面愈合率,冰冻切片观察DAPI标记的BM-MSCs在创伤组织中的示踪,肉芽组织的厚度采用HE染色法检测,CD31和Ki-67的表达采用免疫组化法检测,血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)在创伤组织中的表达采用ELISA和RT-PCR检测。结果：C组的创面愈合最快(P＜0.05),第11天B组的创面愈合率大于A组(P＜0.05)。第2天和第5天的冰冻切片观察发现B组的荧光强度及区域大于A组。而HE染色显示第5天B组的肉芽厚于A组。CD31的免疫组化显示第5天和第8天B组的平均小血管数目多于A组(P＜0.05),而Ki-67的免疫组化结果显示两组无差异。ELISA和RT-PCR的结果均显示第8天和第11天B组的VEGF表达水平高于A组(P＜0.05,P＜0.001)。结论：两种移植方式均促进了大鼠DFUs的愈合,但在愈合的后期,小腿肌肉内的移植方式体现出更好的持续性及高表达的VEGF,证明这种移植方式疗效更优。
糖尿病足溃疡 创面修复 细胞移植 动物模型
WAN Jiangbo 万江波 CAI Qian 蔡黔 LIU Yi 刘毅
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2012-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）