TGF-beta1噬菌体模拟肽抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞活性的实验研究
目的 从噬菌体随机12肽库中筛选获得TGF-betal噬菌体模拟肽,并评估其抑制瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖的疗效.方法 以人TGF-betal单克隆抗体为靶,进行4轮生物淘选,ELISA检测单克隆噬菌体的结合力.对噬菌体DNA进行测序和序列分析.MTT法定量测定活细胞的数量.annexinV-FITC/PI凋亡检测试剂盒和流式细胞仪检测对成纤维细胞的凋亡作用.免疫荧光测定检测模拟肽与成纤维细胞的亲和力.实时定量PCR分析方法检测成纤维细胞中NF-κB,CTGF的表达水平.结果 共获得10种噬菌体模拟肽.MTT结果示4种噬菌体模拟肽(No.7-10)能够抑制成纤维细胞增殖.免疫荧光测定显示是噬菌体上的模拟肽,而不是噬菌体本身,能够与成纤维细胞相结合.凋亡试验显示4种噬菌体模拟肽(No.7-10)能够轻度促使成纤维细胞发生轻度的晚期凋亡.实时定量PCR的结果显示噬菌体模拟肽组(No.7-10)中NF-Kappa B和CTGF的表达降低.结论 噬菌体模拟肽可能是通过调节NF-κB,CTGF的表达,调节瘢痕疙瘩成纤维细胞的增殖.噬菌体模拟肽将来会进行体外检测,可能用于防治瘢痕疙瘩.
噬菌体随机12肽库 TGF-betal噬菌体模拟肽 瘢痕疙瘩成纤维细胞 抑制增殖
刘振中 姜笃银 蔡景龙 宗宪磊 张基勋 单菲 王文婷 王魏
山东大学第二医院美容整形烧伤外科和急诊科,济南250033 山东大学第二医院美容整形烧伤外科和急诊科,济南250033;山东大学第二医院组织工程研究所,济南250033 中国医学科学院整形外科医院,北京100144
国内会议
广州
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292-292
2012-08-30(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)