311在小鼠浅Ⅱ烧伤及体外创伤模型中对表皮干细胞迁移的作用
目的：利用在体和体外模型,研究P311对表皮干细胞迁移的影响.方法：(1)将18只C57BL/6小鼠随机分为6组,在其中5组背部制作浅Ⅱ度烧伤模型,1组不致伤作为对照.在烧伤后6h、12h、24 h、48 h、72 h取材,免疫组化SP法观察P311在正常组织及烧伤创面表达情况.(2)新生C57BL/6小鼠腹腔注射BrdU建立表皮干细胞示踪模型.在6只已被BrdU标记的小鼠背部制作浅Ⅱ度烧伤创面,72h后取材,通过免疫组织化学染色连续切片,观察BrdU阳性细胞和P311阳性细胞的空间共定位关系.(3)应用Ⅳ型胶原快速粘附方法分离培养人表皮干细胞.构建P311腺病毒表达载体,并分别应用携带P311基因的腺病毒载体与空载体感染培养的P2表皮干细胞,培养24h换液、丝裂霉素处理2h行划痕试验.划痕后0h、24 h、48 h、72 h测量固定范围内划痕的面积.两组间采用独立样本t检验统计数据,以p＜0.05认为有统计学差异.结果：实验发现,P311在浅Ⅱ度烧伤创面中不同时相点、不同部位的表达量各不相同.烧伤后创面毛囊、新生表皮中P311表达量逐渐上升；创周表皮及毛囊的P311表达量在烧伤后24h左右达高峰,72h回落至正常.连续切片的免疫组织化学检测结果显示,应用BrdU标记表皮干细胞后,浅Ⅱ度烧伤创面的新生表皮层可见BrdU阳性细胞和P311阳性细胞共定位.应用P311腺病毒载体感染分离培养的人ESCs后,细胞迁移能力较空载体明显增强,在划痕后48h、72h后表皮干细胞的迁移率由对照组的34.51％和45.97％分别增至68.87％和89.30％,p值分别为0.044和0.026.结论：在体及体外实验均表明,P311可明显促进烧伤后表皮干细胞的迁移,可能在烧伤创面修复中起着重要作用.
创面愈合 表皮干细胞 P311 细胞迁移 烧伤
罗高兴 周俊峄 吴军 孙薇 姚志慧 詹日兴 张小容 崔艳艳 谭江琳 杨思思 胡晓红
第三军医大学西南医院全军烧伤研究所,创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室,重庆市疾病蛋白质组学重点实验室
国内会议
广州
中文
365-365
2012-08-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）