脂多糖诱导大鼠主动脉内皮细胞表达血管性血友病因子裂解酶的研究
目的：从剂量-效应和时间-效应关系探讨脂多糖(LPS)对大鼠主动脉内皮细胞(RAECs)血管性血友病因子裂解酶(ADAMTS-13)mRNA和蛋白表达的影响.方法：采用组织贴块法培养Wistar大鼠的RAECs,1周后按1∶3传代至第4～5代,将细胞分为空白对照组和0.01、0.1、1、5 μ g/ml LPS刺激组,分别于12、24、48、72 h用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定内皮细胞ADAMTS-13 mRNA表达；用酶联免疫吸附法(ELISA)检测上清液内ADAMTS-13蛋白水平.结果：空白对照组有一定量的ADAMTS-13mRNA和蛋白表达.随着LPS刺激浓度增加和刺激时间延长,ADAMTS-13 mRNA和蛋白表达逐渐下降.与空白对照组(25.22±1.41)比较,0.01 μ g/ml LPS刺激48 h时ADAMTS-13 mRNA表达(18.78±0.86)即明显下降(P＜0.01)；0.1 μ g/ml和1 μ g/ml LPS刺激24 h时ADAMTS-13 mRNA表达(23.43±0.63、22.41±0.76)即明显下降(P＜0.05和P＜0.01)；5 μ g/ml LPS刺激12 h时ADAMTS-13 mRNA表达(20.01±2.47)即明显下降(P＜0.01).与空白对照组”(115.76±2.36) ng/ml”比较,0.01 μ g/ml LPS刺激12h时ADAMTS-13蛋白表达”(113.43±1.07) ng/ml”即明显下降(P＜0.05)；至5 μ g/mlLPS刺激72 h时ADAMTS-13蛋白表达”(7.63±2.64) ng/ml”降至最低(P＜0.01).结论：RAECs有一定量的ADAMTS-13mRNA和蛋白表达；不同浓度LPS刺激内皮细胞不同时间后ADAMTS-13 mRNA和蛋白表达降低,具有剂量依赖性和时间依赖性.
郑贵军 殷冬梅 武子霞 孙茜 朱海云 李银平
涿州市医院重症医学科,072750 天津市第一中心医院,300192 天津市天和医院,300050 天津市中医药研究院第一附属医院重症医学科,300120
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2012-10-20（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）