利用113Cd和异核NMR方法解析一个CXC结构域的Zn3Cys9簇的配位、结构和DNA结合界面

摘要：

　　本研究克隆了一个CXC结构域,在表达纯化过程中,使用通过核磁共振方法对蛋白质的性质进行了分析,通过质谱测定发现蛋白质中包含有三个Zn离子。由于Zn的核磁共振信号难以观测,使用113Cd取代了蛋白中的Zn离子。利用一维113Cd和二维异核1H-113Cd HSQC,1H-113Cd HMQC-TOCSY方法,测定了三个Cd原子和半胱氨酸的配位关系,发现了一类新的Zn3Cys9簇。结合15N,13C双标记和三共振方法,成功解析了该结构域的结构。通过DNA滴定,测定了该结构域的DNA结合界面和解离常数,并进一步通过突变分析证实了DNA结合界面的关键残基。

关键词： 蛋白质 核磁共振技术 配位化学 结构表征

作者: Yingang Feng 冯银刚 Shanduo Zheng 郑三多 Jia Wang 王佳 Jinfeng Wang 王金凤 Keqiong Ye 叶克穷

作者单位: Qingdao Institute of Bioenergy and Bioproeess Technology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao 26610 中国科学院青岛生物能源与过程研究所,青岛,266101 National Institute of Biological Sciences, Beijing 102206, China;Department of Biochemistry and Mole 北京生命科学研究所,北京,102206;北京师范大学生物化学与分子生物学系,北京,100875 Institute of Biophysics, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100101, China 中国科学院生物物理研究所,北京,100101 National Institute of Biological Sciences, Beijing 102206, China 北京生命科学研究所,北京,102206

会议类型: 国内会议

会议名称: 第十七届全国波谱学学术会议

会议地点: 厦门

会议语种:中文

页码: 29-30

在线出版日期: 2012-10-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）