蛋氨酸脑啡通过多种途径对SH-SY5Y细胞的生长产生抑制作用
目的：研究阿片生长因子蛋氨酸脑啡肽(Methionine Enkephalin,Met-ENK)对SH-SY5Y肿瘤细胞的抑制作用的效果及其途径与机制。方法：采用MTT法检测不同剂量的Met-ENK(10-3、10-4、10-5、10-6、10-7mol/L)对神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y作用48小时后的肿瘤抑制率：采用细胞计数法绘制Met-ENK孵育0h,24h,36h,48h,72h后的SH-SY5Y的生长曲线；采用流式细胞术及PI染色法记录用药孵育48h后,SH-SY5Y细胞周期变化情况；用10-6mol/L的Met-ENK孵育SH-SY5Y 24小时,采用real time-PCR法,检测细胞内p21 Waf1/Cip1,p53基因转录量变化情况；采用western blot法检测不同时间段细胞中p21Waf1/Cip1,p16INK4a,磷酸Rb蛋白的表达量的变化情况；采用过氧化物歧化酶检测试剂盒检测给药后细胞内过氧化物酶的活性变化；采用Flu0 4-AM钙离子染色法检测不停浓度给药后,24小时内细胞内钙离子浓度变化。结果：MTT法结果显示Met-ENK对SH-SY5Y细胞的生长有明显的抑制作用；与空白对照组相比,生长明显缓慢；在Met-ENK作用后主要将细胞抑制于生长周期的G0/G1期；real time-PCR法结果证实p21Wafl/Cip1,p53基因在药物作用后转录量增加；western blot法显示药物作用后细胞内p21 waf1/Cip1,p16INK4a蛋白表达量增加,磷酸Rb蛋白表达量降低；同时发现,细胞内SOD酶活性增加,钙离子浓度随用药量的不同呈现下降的变化趋势。结论：Met-ENK对SH-SY5Y肿瘤细胞有明显的抑制作用,且主要是通过影响细胞周期相关蛋白及酶类表达和活性,细胞内SOD酶活性和钙离子浓度等多种途径发挥抑制SH-SY5Y细胞增殖的作用。
蛋氨酸脑啡肽 肿瘤细胞株 生长抑制 实验药理
刘霏霏 梁宇光 李彦博 刘垚 高洪志 刘泽源
军事医学科学院附属医院临床药理室,北京 100071 军事医学科学院附属医院医务部,北京 100071 军事医学科学院卫生勤务与医学情报研究所,北京 100853
国内会议
成都
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21-28
2012-10-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）