DNA直接克隆修饰新技术研究及其应用

摘要：

　　本文阐述了Red/ET重组克服了传统方法对限制性酶切位点的依赖，不受DNA分子大小的限制，只要很短的同源臂就能介导高效的同源重组。利用全长的RecE/RecT重组酶介导的同源重组，可以将51kb的PKS/NRPS基因簇直接从发光杆菌染色体上克隆下来。其特点克服了文库构建和筛选的繁琐程序为研究微生物次级代谢途径以及发掘新型或者更高生物活性的天然产物提供了极大的便利。同时，介绍了利用同源重组将phiC31 attB位点整合到了放线菌刺糖多抱菌染色体上；而且在PermE启动子的控制下，mariner转座酶可以在刺糖多抱菌细胞内表达，并将mariner转座子整合到刺糖多抱菌染色体上。

关键词： 微生物 克隆技术 次级代谢 同源重组

作者: 夏立秋 王海龙 丁学知

作者单位: 湖南师范大学生命科学学院,微生物分子生物学国家重点实验室培育基地, 湖南 长沙 410081

会议类型: 国内会议

会议名称: 纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会

会议地点: 南京

会议语种:中文

页码: 56-57

在线出版日期: 2012-10-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）