利用易错PCR提高头孢菌素C酰化酶的活性
本研究采用易错PCR，引入不同浓度的Mg2+和Mn2+，得到的易错PCR产物经克隆、转化后进行初筛，共筛选了400株转化子，有35株活性比未突变的酶活性提高，将35株初筛活性提高的转化子用金属鳌合亲和层析法得到纯酶后再进行复筛，其中一株催化活性较出发酶有显著提高，转化率提高了约35％。测序结果显示CPC酸化酶突变蛋白有两个碱基发生突变，第122位氨基酸丙氨酸被替换为缬氨酸，对其转化条件的进一步研究表明其在最适的条件下催化CPC生成7-ACA的转化率达到95％。
抗生素 合成工艺 头抱菌素 酶活性
王颖秋 郑林冲 谢丽萍 朱宝泉 胡又佳
上海医药工业研究院,上海市虹口区中山北一路1111号5号楼
国内会议
纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会
南京
中文
222-223
2012-10-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）