梅毒螺旋体TpF1重组蛋白的表达及其对中性粒细胞的激活作用
目的:为了解纯化梅毒螺旋体TpF1蛋白的功能,探讨其对中性粒细胞的激活作用。方法:以Tp Nichols株基因组DNA为模板,PCR扩增TpF1基因,构建原核表达载体pET28a(+)-TpF1,并转化至宿主菌E.coli BL21(DE3)中进行诱导表达,以基因测序和Western blot分别对扩增片段和重组蛋白进行鉴定;利用化学发光法检测TpF1刺激中性粒细胞后活性氧(ROS)的产生,ELISA法检测髓过氧化物酶的释放量及IL-8的表达水平,同时设立LPS、PMA对照组。结果:基因测序比对结果显示PCR扩增的目的基因与Tp Nichols株TpFl基因完全一致。化学发光法检测ROS生成量,TpFl刺激组明显高于LPS, PMA对照组(P<0.05),同时,ELISA检测结果显示,MPO的释放量和IL-8的表达水平均高于对照组。结论:TpF1可以激活中性粒细胞,引起ROS产生和IL-8的表达量的增高,促进MPO的释放。
梅毒螺旋体 蛋白表达 基因测序 中性粒细胞
蒋传好 赵飞俊 余坚 曾铁兵 吴移谋
南华大学医学院病原生物学研究所 南华大学医学院实验动物部
国内会议
纪念中国微生物学会成立六十周年大会暨2012年中国微生物学会学术年会
南京
中文
231-232
2012-10-26(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)