实时定量PCR检测PML/RARα mRNA技术平台的建立及其在急性早幼粒细胞白血病中的应用
目的 本实验旨在建立用实时定量PCR检测急性早幼粒细胞白血病PML/RARα mRNA的技术平台,探讨急性早幼粒细胞白血病PML/RARα融合基因表达水平与病情及疗效的关系.方法 用扩增培养的NB4细胞的PML/RARα融合基因进行梯度稀释作为标准品、ABL作为内参建立标准曲线；采用Taq Man法进行实时定量PCR,并对方法的可靠性,可重复性及灵敏性进行测定.对14例初治的APL患者(经定性PCR结果确定均为PML/RARα融合基因L型)在初治、诱导缓解及巩固治疗三个时期的PML/RARα mRNA转录本水平进行动态定量监测.结果以校正比值(NQ,normalized quotient)表示,NQ =PML/RARα mRNA的拷贝数/ABLmRNA的拷贝数×105.结果 本实验建立了实时定量PCR的方法来检测L型PML/RARα融合基因,绘制了该基因定量PCR的标准曲线,其回归系数为0.99876.实验可以检测出10-5ugNB4细胞cDNA中PML/RARα的融合基因.
丁士华
安徽医科大学第二附属医学血液科
国内会议
合肥
中文
180-181
2012-08-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）