1种用于分析疾病相关ABO抗原丢失的染色体杂合性缺失方法
目的：建立1种9号染色体杂合性缺失(LOH)的分析方法,以解释因ABO基因附近染色体的LOH导致的疾病相关ABO抗原丢失现象。方法：在9号染色体长臂和短臂上共选取13个微卫星位点,其中10个位点(D9S1677、D9S289、D9S1776、D9S1682、D9S290、D9S164、D9S1818、D9S1826、D9S158、D9S1838)位于ABO血型基因近端,平均间距5.52 cM；另3个位点(D9S1858、D95171、D9S1843)位于ABO基因远端,平均间距39.3 cM.分别设计合成FAM和HEX荧光标记引物,优化PCR扩增后,以聚丙烯酰胺凝胶毛细管电泳,通过GeneMapper软件分析微卫星不稳定性,观察染色体LOH发生情况。结果：13个微卫星位点均得到了较好的PCR扩增效果,PCR产物长度在75～273 bp之间,各位点均有较高的杂合度,适合于微卫星片段长度分析。13个位点可在2个泳道中进行双荧光同步分析,各位点不同等位基因间互不干扰。分别对1例正常血型标本和2例血液病相关的ABO抗原变异标本(包括口腔黏膜DNA和外周血DNA)进行微卫星分析,正常血型标本的口腔DNA和外周血DNA未发现染色体LOH现象。而2例ABO抗原变异标本,与口腔黏膜DNA相比,外周血DNA均存在不同程度的LOH现象,表明ABO抗原丢失可能源于血液系统疾病相关的9号染色体LOH现象。结论：建立了1种基于微卫星不稳定分析的9号染色体LOH方法,可用于血液系统疾病相关的ABO抗原丢失标本分子机制的研究。
血液病 染色体杂合性缺失 ABO血型 抗原丢失
XU Xianguo 许先国 应燕玲 YING Yarling HONG Xiaozhen 洪小珍 LAN Xiaofei 蓝小飞 MA Kairong 马开荣 CHEN Shu 陈舒 朱发明 ZHU Faming LV Hangjun 吕杭军
Blood Center of Zhejiang Province;Key Laboratory of Blood Safety Research,Ministry of Health,Hangzho 浙江省血液中心卫生部血液安全研究重点实验室,浙江杭州310006
国内会议
广州
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1046-1049
2012-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）