银杏雌树成熟叶cDNA文库的构建

摘要：

　　银杏是第四纪冰川时期孑遗的现存地球最古老的植物,为我国特有的经济树种,银杏cDNA文库的构建有助于其分子生物学研究进一步深入.以湖南银杏梅核品种优良单株成熟叶为材料,经变性裂解液分解细胞,提取总RNA,Oligotex mRNA midikit分离纯化出mRNA,用SuperSciptTMⅡRnaseH2 Reverse Transcriptase将其反转录成cDNA,与EcoRI接头连接后插入pBluescriptⅡSK(+)XR载体,电转化感受态细胞DH10B中,进行菌落PCR文库质量检测.研究结果表明,文库总库容量为8.12×105克隆子,重组率为90％,文库插入片段长度约为500～2000 bp.由此可见,构建的银杏雌树成熟叶cDNA文库符合标准,该文库为进一步构建银杏EST文库、筛选目的基因及基因芯片制备等提供了资源基础和有效工具.

关键词： 银杏 基因文库 分子生物学

作者: Wang Yi-qiang 王义强 Tan Xiao-feng 谭晓风 Chen Jie-nan 陈介南 Zhou Xiao-hui 周小慧 Li Fan 李樊

作者单位: Institute of Biological and Environmental Science & Technology, Central South University of Forestry 中南林业科技大学生物环境科学与技术研究所;中南林业科技大学经济林栽培育种国家林业局重点实验室;中南林业科技大学生命科学与技术学院,长沙410004 The Key Laboratory of Non-timber Breeding and Cultivation of National Forestry Ministry, Central Sou 中南林业科技大学经济林栽培育种国家林业局重点实验室 Institute of Biological and Environmental Science & Technology, Central South University of Forestry 中南林业科技大学生物环境科学与技术研究所 School of Life Science and Technology, Central South University of Forestry and Technology, Changsha 中南林业科技大学生命科学与技术学院,长沙410004

会议类型: 国内会议

会议名称: 全国第十七次银杏学术研讨会

会议地点: 江苏邳州

会议语种:中文

页码: 25-30

在线出版日期: 2008-09-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）