里氏木霉木聚糖酶基因Ⅱ在毕赤酵母中的分泌表达及其酶学性质研究
利用RT-PCR技术从高产木聚糖酶菌株T.reesei Rut C-30中成功扩增出其主要木聚糖酶基因XynⅡ,经序列分析证实,在该菌株诱变选育过程中其成熟肽序列有两处碱基发生突变;将不带原基因信号肽的XynⅡ克隆到毕赤酵母高效表达载体pPICZ(a)A上,线性化后经电击转化到毕赤酵母中,经Zeocin及PCR筛选后得到的转化子用1%甲醇诱导.SDS-PAGE证实,重组子实现了分泌表达,且发酵上清中几无杂蛋白;对该重组酶酶学性质分析表明,该酶最适反应温度为60℃,最适反应pH值为6.0,该酶热稳定性较好,在60℃下保温30min仍能保留其85%以上活性.
里氏木霉 木聚糖酶 毕赤酵母 表达
何军 余冰 张克英 丁雪梅 陈代文
四川农业大学动物营养研究所,雅安 625014 教育部动物抗病营养重点开放实验室,雅安 625014
国内会议
广州
中文
420-424
2008-12-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)