PPARα激活物非诺贝特调控HepG2细胞PAI-1基因表达的机制探讨
目的:探讨PPARα的特异性外源性激活物非诺贝特对人肝瘤细胞HepG2细胞PAI-1基因表达的影响和调控机制。<br> 方法:不同浓度非诺贝特刺激HepG2细胞,RT-PCR法检测PAI-1和PPARα mRNA水平。构建四个含PAI-1启动子序列从-804至+17间系列缺失体片段驱动的荧光素酶报告基因质粒,转染HepG2细胞,初步确定位于PAI-1启动子序列-804至+17之间的Smad3/4结合元件(SBE)具有调控作用,采用重叠PCR法对该元件进行定点突变并构建相应重组质粒,转染HepG2细胞。WesternBlot法检测非诺贝特诱导下HepG2细胞中Smad3和Smad4的蛋白表达水平。<br> 结论:PPARα的特异性外源性激活物非诺贝特可从转录水平抑制HepG2细胞中PAI-1基因的表达,PPARα与PAI-1启动子上的Smad3/4结合元件即SBE参与非诺贝特对HepG2细胞PAI-1基因的转录调控,这一过程涉及到Smads蛋白及其介导的Smad信号转导通路。
基因表达 重组质粒 荧光素酶 非诺贝特
陈静 叶平 刘永学 王冬梅 齐书英
白求恩国际和平医院心血管内科,石家庄 050082 解放军总医院南二科,北京 100853 军事医学科学院二所二室,北京 100850
国内会议
广州
中文
277-277
2012-04-11(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)