鸡传染性支气管炎病毒Real-time PCR检测方法的建立

摘要：

　　针对GenBank上登录号为EU116941的鸡传染性支气管炎病毒M 41株中的N基因序列设计合成了一对引物,将构建的重组质粒作为阳性标准品,成功构建检测IBV核酸的SYBR Greenl Real-time PCR检测方法.结果显示,该方法的线性关系好,标准曲线的相关系数达0.995,最低可以检测到5.58×102copies/μL的核酸模板.该检测方法特异性强,与其它禽源病毒不发生交叉反应；重复性试验的变异系数小于3.4％.应用建立的方法对人工感染IBV的30只试验鸡体内的病毒核酸进行检测.结果显示攻毒后第3天和第7天肾脏中病毒含量高于其它组织,证实了临床表现与病毒载量之间有一定关系关系.结果表明,建立的Real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可用于IBV的病原检测及定量分析.

关键词： 鸡传染性支气管炎病毒 病原检测 定量分析 荧光定量PCR法

作者: 王鹏 孟凡伟 周双海 刘凤华

作者单位: 北京农学院动物科学技术学院,北京,102206

会议类型: 国内会议

会议名称: 第三届京津冀畜牧兽医科技创新研讨会暨“瑞普杯”新思想、新方法、新观点论坛

会议地点: 天津

会议语种:中文

页码: 199-203

在线出版日期: 2012-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）