单克隆与混克隆细胞表达外源基因效率的比较
在细胞转染实验中,为了获得高效表达特定基因的细胞,往往需要挑选单个克隆进行后续实验研究;但是这一过程存在筛选周期长,得到稳定单克隆细胞株数量少,长期保存容易丢失目基因等问题。我们通过对胃泌素干扰载体在真核细胞表达的研究,比较经G418抗性筛选获得的混克隆细胞和单克隆细胞沉默胃泌素基因表达水平的变化。结果显示,混克隆细胞胃泌素的干扰效率与单克隆细胞的干扰效率基本相同,混克隆细胞实验与单克隆细胞实验比较,具有实验周期短,操作简单,结果可靠,细胞长期保存较稳定等特点。这一结果表明,利用混克隆细胞进行生物学特性鉴定和后续基因表达水平的研究,实验的真实性高、实验周期短、减少污染机会,这一方法优于挑选单个细胞克隆。
混克隆细胞 干扰效率 胃泌素 外源基因 生物学特性
刘燕 崔建涛 李文梅 邢蕊 吕有勇
北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所分子肿瘤学实验室,恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室
国内会议
北京
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18-22
2012-09-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)