猪脑心肌炎病毒SYBR GreenⅠ real-time PCR检测方法的建立

摘要：

　　针对猪脑心肌炎病毒(Encephalomyocarditis virus,EMCV) VP1基因序列设计并合成一对引物,构建含有该引物扩增序列的重组质粒作为阳性标准品,建立了检测EMCV核酸的SYBR Green Ⅰ real-time PCR方法.该方法线性关系好,标准曲线的相关系数达到0.991；敏感性高,初始模板的检出下限为1×101拷贝/μL,比常规PCR方法高100倍；特异性强,与其他猪源病毒如FMDV、PRRSV、CSFV、PRV均不发生交叉反应；重复性好,组内与组间的变异系数均小于3％.应用所建立的方法检测17份临床可疑病例的心、脑组织样品,样品1份为阳性.结果表明,本研究建立的real-time PCR检测方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可以用于EMCV的病原检测及定量分析.

关键词： 猪脑心肌炎病毒 荧光定量PCR 病原检测 定量分析

作者: Shi-kaichuang 施开创 陈进喜 Chen-jinxi Qu-sujie 屈素洁 Xu-ruisheng 许瑞胜 Xiong-yi 熊毅 Liu-qi 刘棋 陈汉忠 Chen-hanzhon Li-gang 李刚

作者单位: Institute of Animal Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China;Guangx 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 北京 100081;广西动物疫病预防控制中心 广西南宁 530001 广西大学动物科学技术学院 广西南宁 530005 College of Animal Science and Technology, Guangxi University, Nanning 530005, China Guangxi Center for Animal Disease Control and Prevention, Nanning 530001, China 广西动物疫病预防控制中心 广西南宁 530001 Institute of Animal Sciences, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100081, China 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 北京 100081

会议类型: 国内会议

会议名称: 第四届中国畜牧科技论坛

会议地点: 重庆

会议语种:中文

页码: 506-510

在线出版日期: 2009-10-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）