不同毒力弓形虫感染对孕期小鼠巨噬细胞的极化及胎盘滋养细胞凋亡的影响
目的：本文研究了流行于我国的Chinese Ⅰ型弓形虫感染孕中期小鼠后，小鼠巨噬细胞的极化改变及所导致的Th1/Th2偏移，以及对胎盘滋养层细胞凋亡带来的影响。<br> 方法：体内试验：ICR小鼠90只于妊娠第8天随机分别腹腔注射Chinese Ⅰ型或Chinese Ⅱ型弓形虫速殖子200个0.1ml各30只，另外30只注射等量的无菌PBS做对照。分别于妊娠第10、12、14、16、18天颈椎脱臼处死小鼠，取腹腔巨噬细胞和胎盘。部分胎盘匀浆上清和巨噬细胞3h贴壁换液培养24h后的上清测Th1/Th2细胞因子，部分胎盘和巨噬细胞提RNA荧光定量PCR测iNOs、TNF-α、IFN-γ、Fizzi、Yml、Arg-1、IL-4、IL-10、IL-12p40。巨噬细胞蛋白用Westem-blotting验证iNOs和Arg-1。部分胎盘4％甲醛固定石蜡包埋HE染色和TUNEL。部分胎盘用流式Annexin V-EGFP测凋亡。巨噬细胞用流式抗体标记测M1、M2极化情况。巨噬细胞上清测尿素和NO。体外实验：孕鼠于孕1214天无菌操作取胎盘滋养层细胞和巨噬细胞Transwell共培养，速殖子与巨噬细胞1：1分别感染Chinese I型和Chinese II型虫株，设一组不加速殖子做对照.分别于2h, 6h, 12h. 24h收集上清和巨噬细胞，滋养层细胞做流式Annexin V-EGFP测凋亡和固定做TUNEL。巨噬细胞的上清、RNA、蛋白检测同体内实验。<br> 结果：三组胎盘随着妊娠天数的增加凋亡率都上升，但同时间相比，Chinese I型组凋亡率高于Chinese II型，Chinese II型又高于对照组。Chinese II型虫株感染的小鼠腹腔巨噬细胞在孕14天开始出现高水平的NO，孕16天达高峰，孕18天消退：其他两组无NO产出。体外实验中，2h, 6h. 12h.24h的巨噬细胞上清中，Chinese I型感染的各时间点上清都出现高水平的尿素，即精氨酸酶的活性高，而Chinese II型感染的上清则比对照组稍高一点点。<br> 结论：Chinese I型虫株感染后，孕鼠巨噬细胞向M2型极化，致体内免疫偏向Th2型，使得弓形虫速殖子大量繁殖，破坏宿主细胞，各种原因(营养供应或生存的稳态环境遭破坏)滋养层细胞凋亡增加；而ChineseII型感染后，孕鼠巨噬细胞向M1型极化，致体内免疫偏向Thl型，原先的妊娠Th2型的环境被迫转向Thl型，大量炎症介质产生，机体变得不耐受，也使滋养层细胞凋亡增加。
弓形虫 巨噬细胞 胎盘滋养层 细胞凋亡 孕期感染
刘婷婷 蔡亦红 李敏 余莉 都建 汪学龙 罗庆礼 沈继龙 张倩 刘丽丽 徐修才 陈鹤 王花 孔兰婷 王为为 张爱梅
安徽医科大学病原生物学教研室 安徽省病原生物学实验室 安徽省人兽共患病重点实验室
国内会议
2012年安徽省医学会微生物与免疫学、热带病与寄生虫病学会换届改选与学术研讨会
黄山
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111-113
2012-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）