我国弓形虫分离株SAG3基因的比较及其毒力分析
目的：探明流行我国刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)基因型分布及其对小鼠毒力，观察我国强毒株在感染小鼠体内的动态分布，以期为我国刚地弓形虫种群进化研究和弓形虫病的诊断防治提供思路。<br> 方法：采用PCR-RFLP和DNA序列分析对来源于国内不同地域的12株刚地弓形虫以及基因型Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型虫株的SAG3基因进行比较分析；弓形虫TgCatwh1、1gCatwh3、TgCatwh6、TgCatys2、TgCatsx1和TgCatgd1速殖子1×103个腹腔感染SPF级KM小鼠，观察小鼠的存活率和死亡时间；同时取TgCatwh3感染小鼠，于感染后第2、4、6、8天，荧光定量PCR方法检测弓形虫在血液、心、肝、脑和淋巴结组织中的动态分布。<br> 结果：来源于国内不同地域的12株刚地弓形虫SAG3经PCR-RFLP分型只显示为一种带型，与基因Ⅲ型虫株一致；SAG3基因序列分析显示我国12个弓形虫虫株的NciI酶切位点与国外报道的VEG株一致，同属于基因Ⅲ型，与PCR-RFLP分析结果结果相吻合。除酶切位点外，12个弓形虫株与ToxoDB注册的GT1株及ME49和VEG株进行序列比对分析发现，不同基因型弓形虫株SAG3基因有个别碱基的差异，可能为地理隔离所致的遗传变异。弓形虫TrgCatwh3、TgCatys2、TgCatsx1和TgCatgd株速殖子1×103个腹腔感染KM小鼠，小鼠于5-10天内死亡，腹腔冲洗液涂片可见大量速殖子，为强毒株；弓形虫TgCatwhl和TgCatwh6速殖子经腹腔感染KM小鼠，小鼠只出现一过性的炎症反应，存活小鼠脑组织压片可见大量包囊，为弱毒株。感染后第2天，TgCatwh3虫体即出现在淋巴结和肝组织中，拷贝数分别为2.56±0.097和3.24±0.297，感染后第4天见于血液(4.35±0.507)、心(4.97±0.318)和脑组织(4.89±0.395)；血液中虫体随时间推移逐渐增多，第6天时显著增多(P<0.05)，第8天达到高峰(7.75±0.299)；心和脑组织中虫体量各时间点之间没有显著性差异(P>0.05)，并以恒定水平持续到实验结束。<br> 结论：我国刚地弓形虫具有有限的基因型，即使在相同的基因型内也存在不同毒力的虫株；弓形虫强毒株经腹腔感染KM小鼠，虫体首先侵入腹腔内器官，然后通过血液循环到达全身各器官。
刚地弓形虫 基因型分布 毒力分析 DNA序列 SAG3基因
王林 蔡亦红 张爱梅 沈继龙 黄开泉 宋晓蓉 徐修才 余莉 罗庆礼 陈兆武 霍星星
安徽病原生物学省级实验室，人兽共患病安徽省重点实验室，安徽医科大学病原生物学教研室，合肥 230032 安徽中医学院第一附属医院检验中心，合肥 230031 安徽病原生物学省级实验室，人兽共患病安徽省重点实验室，安徽医科大学病原生物学教研室，合肥 230032 安徽医科大学附属省立医院 安徽中医学院第一附属医院检验中心，合肥 230031
国内会议
2012年安徽省医学会微生物与免疫学、热带病与寄生虫病学会换届改选与学术研讨会
黄山
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115-116
2012-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）