土鳖虫胰酶酶解物抗凝活性部位分离纯化及组成分析
(0) 目的:采用溶剂萃取和凝胶柱色谱法对土鳖虫胰酶解物进行分离纯化，初步确定其抗 凝活性部位及化学成分组成。方法:应用胰酶酶解法制备土鳖虫胰酶酶解物，以APTT 凝血 时间为指标，采用溶剂萃取法，获得抗凝活性部位IV，经凝胶柱色谱法对其进行进一步分 离纯化获得胰酶酶解纯化物，采用考马斯亮蓝法对其进行定量，通过MALDI-TOF-MS 法检 测分离部分的分子量分布范围。结果:土鳖虫胰酶酶解物部位IV 有较强的抗凝活性，其抗 凝活性强度与浓度相关；部位IV 经Sephadex G-25 纯化后考马斯亮蓝法测得其蛋白含量为 5.5％；进一步用Sephadex G-10 脱盐的纯化物，采用MALDI-TOF-MS 检测确定为分子量在 850～910Da 间的3 组多肽混合物。结论:体外抗凝实验表明，凝胶柱色谱法分离纯化土鳖 虫胰酶酶解物方法可行，抗凝活性组分为小于1000Da 的小分子肽类。
Eupolyphaga trypsin hydrolysates anticoagulant activity sephadex gel column chromatography MALDI-TOF-MS micromolecular peptide isolation and purification
曹艳玲 伍水龙 李濯冰 于季萍 赵韶华 王玉蓉 张玉杰
北京中医药大学中药学院,北京 100102 哈尔滨商业大学生命科学与环境研究中心,黑龙江 哈尔滨 150028 北京中医药大学中药学院,北京 100102 河北以岭医药集团,石家庄 050035
国内会议
黄山
中文
1-7
2012-08-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）