草鱼呼肠孤病毒HZ08株VP4蛋白多克隆抗体的制备及其特性分析
目的：表达草鱼呼肠孤病毒(GCRV)HZ08株VP4蛋白及制备VP4蛋白高效价多克隆抗体并对其特性进行初步分析。方法：采用PCR方法扩增草鱼呼肠孤病毒HZ08株s6基因(表达VP4蛋白)部分节段，经BamHI和Xho I双酶切后插入pET-32a(+)原核表达载体，构建的pET32a—s6重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株，经IPTG诱导表达，SDS—PAGE鉴定目的蛋白的表达并提取包涵体，纯化目的蛋白。然后用纯化蛋白免疫新西兰大耳白兔制备多克隆抗体，以间接ELIsA方法测定其效价，并以Western blot鉴定抗体特异性和识别天然蛋白的免疫学特性，结果：SOS—PAGE电泳分析显示，表达的目的蛋白约为51kDa，与预期结果相符，制备的多克隆抗体效价达1：8000以上，且具有较高的特异性，制备的多克隆抗体血清对天然蛋白-病毒结构蛋白具有良好的识别能力。结论：制备了具有高亲和性、特异性和良好识别天然蛋白能力的抗VP4蛋白多克隆抗体，为GCRV的检测、VP4的生物学功能和抗原表位深入研究奠定了基础。
草鱼 呼肠孤病毒 蛋白基因 多克隆抗体
曾伟伟 王庆 刘宝芹 刘永奎 石存斌 吴淑勤
农业部渔药创制重点实验室，中国水产科学研究院珠江水产研究所，广州，510380
国内会议
北京
中文
700-705
2012-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）