永生化人肝细胞的初步研究:hTERT真核表达质粒的构建和鉴定
目的：构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)真核表达质粒，为hTERT稳定转染细胞提供简单、快速的检测方法，并为建立永生化人肝细胞系奠定基础。方法：PCR扩增hTERT基因和绿色荧光蛋白(GFP)基因，利用基因重组技术构建真核表达质粒VR1012-GFP-hTERT，筛选阳性克隆进行双酶切、PCR和序列测定，转染HepG2细胞，在荧光显微镜下观察hTERT与GFP的表达情况。结果：双酶切、PCR鉴定结果与预期相符；VR1012-GFP-hTERT在HepG2细胞内表达，并主要分布在细胞核内。结论：重组真核表达质粒VR1012-GFP-hTERT的构建成功，为hTERT转染细胞提供简洁、快速、实时的检测方法，为建立永生化人肝细胞奠定了基础。
永生化人肝细胞 人端粒酶逆转录酶 质粒构建 真核表达 功能鉴定
赵擎 孙颖 胡燕 侯俊 游绍莉 赵军 辛绍杰 貌盼勇
解放军第302医院 100039
国内会议
洛阳
中文
414-416
2007-04-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）