密码子优化对乙肝病毒表面抗原中蛋白核酸疫苗免疫原性的影响

摘要：

　　目的：观察密码子优化能否增强乙型肝炎病毒表面抗原中蛋白核酸疫苗的免疫原性。方法：根据乙型肝炎病毒(adr亚型)表面抗原中蛋白(MHBs)的氨基酸序列，在不改变其氨基酸序列的基础上，设计并人工合成了密码子优化的基因，并将该基因克隆到核酸疫苗载体pSW3891中，构建了密码子优化的表达MHBs核酸疫苗(命名为：pSW3891/MHBs/adr/opt，简称opt)。用上述核酸疫苗与表达野生型MHBs核酸疫苗(命名为：pSW3891/MHBs，/adr，简称adr)及空载体质粒pSW3891一起瞬时转染293T细胞，应用蛋白质印迹法检测转染细胞中MHBs的表达。采用肌肉注射法，以opt、adr及pSW3891，分别对BALB/c小鼠进行免疫。用ELISA方法检测免疫后小鼠血清中HBs抗体的滴度，ELISPOT法检测免疫小鼠表面抗原特异性分泌IFN-γ的脾细胞。结果：opt和adr均可在体外293T细胞中高效表达，且opt的蛋白表达量要高于野生型。opt免疫组小鼠特异性抗体滴度和免疫小鼠表面抗原特异性分泌IFN—γ脾细胞数量都要显著的高于adr免疫组小鼠。结论：密码子优化可以增强乙型肝炎病毒DNA疫苗在体外的蛋白表达量及免疫小鼠的体液免疫和细胞免疫原性。

关键词： 乙型肝炎病毒 表面抗原 核酸疫苗 免疫原性 密码子优化

作者: 杜合娟 王世霞 李军 黄祖瑚 卢山 邢益平

作者单位: 南京医科大学第一附属医院感染科 江苏南京 210029

会议类型: 国内会议

会议名称: 第11届全国中医药防治感染病学术大会暨江苏省中西医结合肝病学术年会

会议地点: 扬州

会议语种:中文

页码: 199-208

在线出版日期: 2011-04-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）