环境化学物雄激素干扰活性检测方法的建立
目的：建立雄激素受体(AR)介导的荧光素酶(Luc)报告基因试验方法，为化学物拟/抗雄激素活性的检测提供研究工具。方法：构建受雄激素反应元件调控的荧光素酶报告基因质粒pMMTV-Luc，将该质粒与表达AR的质粒AR/pcDNA3.1和阳性对照质粒phRL-tk共转染CV-1细胞，建立AR报告基因试验。以5α-双氢睾酮(5α-DHT)为阳性对照检测该方法的筛选效率。CV-1转染后用受试化学物染毒，根据Luc表达的变化，判断化学物的雄激素干扰活性。结果：5α-DHT对共转染三种质粒的CV-1的诱导作用表现为：10-10M的5α-DHT显著诱导：Luc的表达，10-7M时达最大值，诱导倍数为61.83倍，计算其半数效应浓度EC50为3.65nM。糖皮质激素受体(GR)激动剂地塞米松(dexamethasone)不诱导Luc的表达。AR拮抗剂氟他胺(flutamide)在10-7M-10-5M浓度范围内显著拮抗1nM的5α-DHT诱导的Luc的表达，其半数抑制浓度(IC50)为3.49μM。BPA在10-6M和10-5M时能拮抗1nM 5μ-DHT诱导的Luc的表达，其IC50为2.14μM。结论：本研究建立的AR报告基因试验具有较高的灵敏度和特异性，化学物BPA具有抗雄激素活性。
内分泌干扰物 抗雄激素活性 转录激活试验 检测技术 效果评估
孙宏 司朝宗 甄世祺 陈晓东 陈连生
江苏省疾病预防控制中心 东南大学医学院，江苏南京 210009
国内会议
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23-28
2011-01-06（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）