PLK1干扰质粒构建及对人肝癌SMMC-7721细胞株凋亡的影响
目的：构建polo样激酶-1(PLK1)基因小干扰RNA(siRNA),观察其对肝癌细胞凋亡的影响。方法：设计合成3个PLK1 siRNA(siRNA1、siRNA2、siRNA3)干扰序列,构建干扰载体,转染人肝癌细胞株SMMC-7721后,采用实时定量RT-PCR方法筛选下调PLK1 mRNA效果最好的siRNA；然后以该siRNA转染SMMC-7721细胞后,分别以实时定量RT-PCR和western blot检测各组细胞PLK1基因和蛋白表达情况；流式细胞仪检测细胞周期及细胞凋亡的改变。结果：肝癌细胞系SMMC-7721中存在PLK1蛋白的过表达。应用靶向PLK1的siRNA转染SMMC-7721细胞,48小时后,PLK1mRNA相对水平siRNA2组分别较无关对照组和空白对照组下降了74％和78％,而PLK1蛋白的表达siRNA2组分别较无关对照组和空白对照组下降了83％和88％,抑制率达88％；siRNA2组中出现大量凋亡细胞,与对照组相比有显著统计学差异(P<0.05)。结论：PLKl基因在肝癌细胞增殖中具有重要的调控作用。PLK1 siRNA转染可明显抑制癌细胞增殖,诱导凋亡是其重要机制之一。
肝癌 细胞凋亡 polo样激酶-1 干扰质粒构建
倪侃 陈佳慧 贾乃昕 吴龙翔 常仁安 陈钟
南通大学附属医院普外科
国内会议
2012国际肝胆胰外科昆山论坛暨第24届肝胆胰外科学术经验交流会
江苏昆山
中文
198-203
2012-05-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）