香蕉条斑病毒云南分离物ORFI的原核表达及其抗血清制备
以连接在pMD-18T载体上的香蕉条斑病毒云南分离物(BSV)全基因组为模板，设计特异引物，PCR扩增获得ORF I全长序列。目的片段和表达载体pET32(b)分别经Eeo R I和Xho I双酶切后，连接构建重组质粒pET32-ORF I，将鉴定为正确的重组质粒转化E．coli BL21(DE3)感受态细胞，获得原核表达OFR I工程菌。工程菌在28℃条件下，用浓度为O．1mmol／L的IPTG诱导表达6h，离心集菌并超声波破碎，获得以含目的肽段可溶性蛋白为主的融合蛋白。将融合蛋白通过Ni2+-NTA亲和层析柱纯化后，得到纯度较高的融合蛋白。以此蛋白为抗原免疫家兔，获得特异抗血清，该抗血清的效价达l：100,000，Western Blot验证表明，抗血清的特异性较强。本研究为BSV的快速检测以及BSV编码蛋白的功能研究奠定了基础。
香蕉条斑病毒 原核表达 抗血清 分离物
王健华 林湛松 张雨良 杨文君 余乃通 刘志昕
冲国热带农业科学院热带生物技术研究所，农业部热带作物生物技术重点开放实验室，海口 571101 海南大学环境与植物保护学院，儋州，海南，571737 海南大学环境与植物保护学院，儋州，海南，571737
国内会议
2011年度中国热带作物学会遗传育种专业委员会年会暨学术研讨会
南昌
中文
159-163
2011-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）