应用多重RT-qPCR检测甘蔗黄叶病毒和高粱花叶病毒

摘要：

　　基于已报道的甘蔗黄叶病毒(ScYLV)cp基因和高粱花叶病毒(Sorghum mosaicvirus,SrMV)NSP基因序列设计特异性引物，建立了针对这两种病毒的荧光定量PCR检测方法。在此基础之上，利用扩增产物TM值的不同，建立了可区分ScYLV与SrMV的多重SYBRGreen-I实时荧光定量PCR方法，两种病毒扩增产物的TM值分别为82.8-83.8℃和85.6-86.6℃。检测数据显示：SrMV和ScYLV均有各自的特异性的峰值出现，而健康植株无特异性峰值；在单独检测中的检出水平可分别达到500copy/μL和250copy/μL；两种病毒TM值的批内变异系数分别为0．03％和0．02％，批间变异系数分别为2．06％和3．12％。综上所述，所建立的多重SYBRGreen-I实时荧光定量PCR方法在对以上两种病毒的检测中具有较好的特异性、敏感性和稳定性。

关键词： 甘蔗黄叶病毒 高梁花叶病毒 实时荧光 病毒检测 序列分析 重组质粒

作者: 王洪星 张雨良 王健华 章绍延 熊国如 张树珍 刘志昕

作者单位: 海南大学环境与植物保护学院，海南儋州 571737 中国热带农业科学院热带生物技术研究所／农业部热带作物生物技术重点开放实验室，海南海口 571101 中国热带农业科学院热带生物技术研究所／农业部热带作物生物技术重点开放实验室，海南海口 571101

会议类型: 国内会议

会议名称: 2011年度中国热带作物学会遗传育种专业委员会年会暨学术研讨会

会议地点: 南昌

会议语种:中文

页码: 168-173

在线出版日期: 2011-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）