构建表达分泌型和无分泌型大鼠gremlin1的真核表达载体

摘要：

　　目的：分别构建能表达分泌型和非分泌型gremlinI蛋白的真核表达系统。方法：采用普通PCR技术从本实验组构建的peDNA3．1(+)-gremlinl重组质粒中分别获得全长的大鼠gremlinl基因(gremlinl)和去掉信号肽的gremlin1基因(gremlinl-DS)，将它们分别克隆到真核表达载体pEFl／Myc．His C上，经酶切和DNA测序鉴定；分别将两组重组质粒经脂质体转染到非洲绿猴肾细胞株COS．7中，免疫荧光检测两组gremlinI基因的表达。结果：pEF1／Myc-His C·gremlinl和pEF1／Myc-His C·gremlinl-Ds真核表达载体经双酶切鉴定显示大小分别为555bp和483bp；DNA测序与gremlinl基因序列(NM-019282)完全吻合；将它们转染到cos-7细胞后显示，两者均能在细胞内成功表达。结论：成功构建j-pEFl／Myc-His C-gemlml、pEF1／Myc-His C-gremlin1-DS真核表达载体。

关键词： 动物模型 纤维化疾病 分泌型蛋白 真核表达载体

作者: 万林燕 张巧娟 彭虎 石慧 柳长柏 吴江锋

作者单位: 443002 宜昌，三峡大学医学院20091283班 三峡大学医学院20101292班 三峡大学医学院 20104282班 三峡大学医学院

会议类型: 国内会议

会议名称: 第四届北京热带医学与寄生虫学论坛

会议地点: 北京

会议语种:中文

页码: 160-163

在线出版日期: 2012-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）