广西巴马小型猪U6和7SK小RNA启动子的克隆及功能验证
目的：探讨巴马小型猪U6和7sk的沉默效应，为生产GGTA1基因沉默的广西巴马小型猪奠定基础。方法：本研究克隆并分析了巴马小型猪siRNA启动子U6和7SK，并利用PMD18-shEGFP载体对PEGFP-N1在猪肾细胞中的表达进行了RNAi实验。该研究以人U6启动子为阳性对照、无启动子的PMD18-shEGFP载体为阴性对照、单独转染PEGFP-N1为空白对照，验证这两种启动子在猪细胞中的功能。结果：试验表明：广西巴马小型猪RNA聚合酶Ⅲ型siRNA启动子U6和7SK的序列全长分别为553bp和437bp。成功构建了PMD18-pU6-shEGFP和PMD18-p7SK-shEGFP干扰载体，转染猪源PK-15细胞，证明U6以及7sk两个启动子具有较高的siRNA表达活性。结论：广西巴马小型猪U6和7sk具有较高的siRNA表达活性，可以用于α-1,3半乳糖转移酶等猪源基因的沉默实验。
巴马小型猪 基因启动子 沉默效应 基因克隆
陈时锦 范晶 蒋钦杨 兰干球 郭晓萍 郭亚芬
广西大学动物科学技术学院,南宁 530005
国内会议
海口
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803-820
2011-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）