腺病毒介导的鸟氨酸脱羧酶(ODC)和S-腺苷甲硫氨酸脱羧酶(AdoMetDC)双反义RNA抑制肺癌A-549细胞的实验研究
目的:探讨重组腺病毒Ad-ODC-AdoMetDCas介导的ODC和AdoMetDC反义RNA对肺癌A-549细胞增殖和侵袭的抑制作用。方法:采用FACS检测Ad-GFP感染细胞中GFP表达,以测定不同MOI的腺病毒对肺癌A-549细胞的基因转染效率;应用MTT法实验观察Ad-ODC-AdoMetDCas对肺癌A-549细胞生长增殖的影响;采用Western印迹和HPLC的方法分别检测腺病毒对肺癌A-549细胞中ODC和AdoMetDC蛋白表达以及胞内多胺含量的抑制作用,并应用TUNEL标记检测法观察Ad-ODC-AdoMetDCas对肺癌细胞凋亡的影响。结果:基因转染效率实验结果显示:以50 MOI的Ad-GFP感染肺癌细胞48小时后,大约有75%肺癌A-549细胞GFP表达阳性;应用MTT法实验观察Ad-ODC-AdoMetDCas对肺癌A-549细胞生长增殖有明显抑制作用。以Ad-ODC-AdoMetDCas感染肺癌A-549细胞,可明显抑制肺癌细胞中ODC和AdoMetDC基因表达,基因抑制率大于60%。HPLC结果显示,肺癌A-549细胞感染Ad-ODC-AdoMetDCas后细胞内三种多胺含量都明显降低。TUNEL标记检测结果证实Ad-ODC-AdoMetDCas可引起肺癌A-549细胞明显凋亡。结论:ODC和AdoMetDC双反义腺病毒具有显著抑制肺癌增殖和侵袭的作用,对于肺癌的防治研究具有一定的意义,有望成为治疗肺癌的基因药物。
肺肿瘤 基因药物 药理机制 疗效评价
田辉 孙启峰 刘贤锡 张冰 张岩 孙东峰
山东大学齐鲁医院胸外科 山东大学医学院分子生物学实验中心
国内会议
济南
中文
336-343
2007-09-01(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)