scTRAIL融合表达及生物学作用研究
1995年发现的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)，是肿瘤坏死因子超家族成员之一，属于Ⅱ型跨膜蛋白。本研究中，尝试将人TRAIL114-281三聚体的三个单体的氨基酸片段以两段柔性氨基酸短臂(GGGS)3，头尾相连，使之融合成为一条多肽链scTRAIL，即：TRAIL114-281-(GGGS)3-TRAIL114-281-(GGGS)3-TRAIL114-281，以增强抗肿瘤的效果。通过PCR和限制性内切酶酶切、连接技术，获得编码单链化蛋白scTRAIL的基因序列，构建了含编码人scTRAIL基因的重组质粒，在宿主菌E.coli BL2I中得到了较高水平的表达，并用麦芽糖结合蛋白亲和层析柱对表达产物进行了初步纯化，获得了融合了麦芽糖结合蛋白标签的可溶性重组蛋MBP-scTRAIL。用ICR小鼠作为实验动物，腹腔注射MBP-scTRAIL溶液，连续观察14天，检测其急性毒性。结果表明，MBP-scTRAIL的抗肿瘤活性明显高于MBP-TRAIL114-281；在动物急毒实验中，MBP-scTRAIL未对实验动物表现毒性，对正常机体组织无损伤。预示着该蛋白在肿瘤临床治疗上具有良好的应用前景。
MBP-scTRAIL蛋白 蛋白表达 基因治疗 抗肿瘤效果
许骥 焦炳华 刘魏 王铮 孙铭娟 宋婧文 范晨 倪长伟 乐媛 王梁华
第二军医大学基础部生物化学与分子生物学教研室 上海 200433
国内会议
银川
中文
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2011-08-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）