西藏小型猪胚胎成纤维细胞的分离培养及性别鉴定

摘要：

　　目的：探索和建立西藏小型猪胚胎成纤维细胞体外分离培养及性别鉴定的技术方法。方法：取35d的西藏小型猪胚胎分离胚胎成纤维细胞，进行体外原代培养及传代培养，观察细胞成纤维细胞的形态和生长状况。根据猪Y染色体上性别决定基因SRY设计引物进行性别鉴定，同时以β珠蛋白作为内参基因，建立PCR反应体系鉴别胚胎的性别。结果：西藏小型猪胚胎成纤维体外分离后，呈贴壁生长，快速增殖。PCR性别鉴定结果表明雄性胚胎细胞可扩增出一特异性SRY基因条带，而雌性则没有。该法可快速鉴定胚胎的性别，可用于体细胞克隆动物早期性别鉴定。结论：研究结果表明利用胶原酶消化法所获得的西藏小型猪胚胎成纤维细胞可在体外稳定培养并传代，利用PCR鉴定猪胎儿性别具有简单、快速、准确的特点，可应用于克隆猪研究中体细胞系的早期性别鉴定。

关键词： 西藏小型猪 胚胎成纤维细胞 分离培养 胶原酶消化法 性别鉴定

作者: 黄黎珍 那顺巴雅尔 赖良学 顾为望

作者单位: 南方医科学实验动物中心广州 510515 中科院广州生物医药与健康研究院广州 510602

会议类型: 国内会议

会议名称: 2011东莞第二届国际小型猪学术论坛暨大型实验动物生物医药研究应用研讨会

会议地点: 东莞

会议语种:中文

页码: 309-312

在线出版日期: 2011-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）