重组人SOD2/3杂合酶原核表达及纯化方法的研究
目的：获取活性高的重组人SOD2/3杂合酶(以下简称rh SOD2/3)，摸索表达过程中的不同的条件，得到最高活性的粗酶液并纯化rh SOD2/3。方法：利用含有pET-SOD2/3的工程菌诱导表达rh SOD2/3杂合酶，考察诱导温度、诱导剂浓度、Mn2+浓度与加入时机对重组酶表达量和活性的影响；利用金属螯合亲和层析纯化rh SOD2/3。结果：重组酶的表达量占菌体总蛋白40～50％，最佳表达条件为15℃ 0.5mmol/L IPTG,同时加入2.5mmol/L Mn2+诱导16h，发酵破碎液中SOD活力达4000U/ml以上，比活近600U/mg．pr。亲和层析能较好的纯化重组酶，比活可提高到3000U/mg．Pr以上。结论：获得了rh SOD2/3表达的最适条件及纯化方法。
重组超氧化物歧化酶 蛋白表达 亲和层析
周大海 范立强 赵健 程安阳
华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室，上海，200237
国内会议
河北廊坊
中文
70-76
2011-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）