高压氧干预对骨髓间充质干细胞培养及增殖分化的作用
目的：探讨骨髓间充质干细胞(BMSCs)培养方法及高压氧干预对其增殖分化的影响。方法：采用全骨髓细胞贴壁培养法提取绿色荧光蛋白小鼠骨髓间充质干细胞进行培养。取P3代骨髓间充质干细胞。用神经节苷脂和胶质细胞源性神经生长因子诱导液进行成神经元样细胞诱导,并在培养及诱导时进行高压氧干预。取P3代细胞,消化至24孔板内,细胞接种浓度为105个/cm2。高压氧治疗压力200kPa(2ATA),匀速升、减压各20分钟。稳压50min,全程给氧(90分钟),每日1次,细胞增殖期高压氧共7次,细胞诱导时高压氧共2次。未行高压氧处理的细胞做为对照组。采用免疫荧光检测NSE表达,绘制细胞生长曲线。结果：贴壁培养法分离培养骨髓间充质干细胞,经多次换液后可达到纯化细胞。高压氧干预组间充质干细胞对数生长期提前,进入平台期后细胞数量多于对照组,高压氧干预后细胞于24h内出现轴突、树突,48h后两组比较,高压氧干预组80％以上细胞出现突起,且突起较长、粗、连成网状,未干预组突起的细胞比例不足80％,细胞分散、突起短、未连成网状。结论：骨髓间充质干细胞全骨髓贴壁培养法操作简单,细胞繁殖能力强,经高压氧干预后骨髓间充质干细胞生长加快,在细胞诱导时联合高压氧干预,细胞分化数量多,突起长。提示高压氧能促进体外骨髓间充质干细胞向神经元样细胞增殖和分化。
高压氧 骨髓间充质干细胞 体外培养 细胞增殖 细胞分化
白志峰 卢晓欣 彭慧平 王如密
南京军区福州总医院高压氧科 福州 350025
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39-42
2011-11-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）