实时定量RT-PCR检测急性白血病相关miRNA
目的：探讨miRNA和AL染色体核型、FMS样酪氨酸激酶3-内部串联重复(FLT3-ITD)突变之间的关系。方法：对象为147例AML (M0 1例，M1 12例，M2 48例，M3 14例，M4 13例，M5 15例，M6例 3例，M7 1例)，40例ALL和10例CML急变(急非淋变6例，急淋变4例)患者。提取其骨髓或外周血标本总RNA，并进行引物特异性反转录，采用Roche LightCycler定量PCR对miRNA进行定量检测。结果：qRT-PCR检测miRNA仅需10-50 ng总RNA样本，10倍系列稀释法制作的标准曲线，呈现良好的线性关系（r2＞0.980)，扩增效率均＞0.9，批内差、批间差均＜5%。分析发现与AML组比较，miRNA-128在ALL组显著高表达(P＜0.01)，而let-7b和miR-223则在ALL明显低表达(P值均＜0.01)。结论：采用qRT-PCR方法检测miRNA表达敏感可靠，miR-128, let-7b, miR-223和miR181a在ALL、AML及其亚型和正常人群表达各有特点，对AL分型诊断有一定参考价值。MiR-181a在AML染色体核型预后较差组表达增高，miR-155高表达于FLT3-ITD突变阳性组，提示miRNA对疾病预后的判定有指导意义。
急性白血病 miRNA RT-PCR法 定量检测
朱远东 徐卫 缪扣荣 朱丹霞 方成 董华洁 王冬梅 乔纯 李建勇
南京医科大学第一附属医院、江苏省人民医院血液科 210029
国内会议
天津
中文
100-101
2011-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）