中国血友病患者FⅧ抑制物形成的免疫因素研究
目的：对中国血友病FⅧ抑制物阳性患者免疫因素进行初步研究，进一步明确FⅧ抑制物产生的免疫相关机制以及与欧美的差异。方法：①淋巴细胞亚群分析：从南方医院血友病中心登记的具有完整病史资料的患者中进行FⅧ抑制物定量筛查，选取15例FⅧ抑制物阳性患者，选取临床特征匹配的9例FⅧ抑制物阴性血友病A患者作为对照组。采用流式细胞术分析淋巴细胞亚群，包括CD4+T细胞，CD8+T细胞，NKT细胞，CD4+CD25+T细胞，CD4+FoxP3+T细胞等。②CD4+T淋巴细胞体外FⅧ刺激增殖分析：选取FⅧ抑制物阳性患者14例，抑制物阴性患者6例作为对照。抽取肝素抗凝外周血10 ml；淋巴细胞分离液提取外周血单个核细胞(PBMCs)，采用CD8+磁珠去除分选，获得CD8+去除CD4+T富集的PBMCs，于96孔板内进行体外培养，加rhFⅧ(1U/ml)刺激，并设空白对照组和PHA对照组；37℃，5%CO2培养72 h后，加CCK-8，继续培养4h，测450 nm A值计算增殖抑制率。⑧体外FⅧ刺激CD4+T淋巴细胞的细胞因子分泌检测：选择抑制物阳性患者12例，抑制物阴性患者6例作为对照；将上述CD4+T细胞体外刺激培养的上清，用酶联免疫吸附法(ELISA)检测IL4、IFN-γ和TGF-β分泌情况。结论：①血友病FⅧ抑制物阳性患者与抑制物阴性患者的各淋巴细胞亚群均在正常范围；②FⅧ抑制物阳性与阴性患者相比，Treg细胞比例有减低趋势，但无统计学差异；③FⅧ抑制物阳性患者CD4+T淋巴细胞体外FⅧ刺激后能产生明显的增殖反应，而抑制物阴性患者无明显增殖，证实FⅧ特异性CD4+T细胞的存在，也说明CD4+T细胞在抑制物产生过程中具有重要作用；④血友病A患者CD4+T淋巴细胞体外刺激培养后，FⅧ抑制物阳性组与阴性组之间IL-4、IFN-γ、TGF-p分泌差异无统计学意义。
血友病 FⅧ抑制物 免疫病理
宋晓玲 孙竞 周璇 李强 刘阳 易正山
南方医科大学南方医院血液科 广州,510515
国内会议
天津
中文
246-247
2011-09-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）