内含子A增强抗原表达效率及提高DNA疫苗免疫原性的实验研究
目的:探讨以内含子A增强外源抗原在真核细胞中的表达效率并提高DNA疫苗的免疫原性。方法:以分枝杆菌HSP65为模式抗原,将其分别克隆入含有内含子A和不含内含子A的真核表达载体pCMV4.0和pVAxl,将表达HSP65的不同重组质粒转染293T细胞系并免疫接种小鼠,以ELISA分析其所诱导产生的抗原特异性抗体水平及亚类,并以ELISPOT和胞内细胞因子染色技术分析其诱导产生的细胞免疫应答反应。结果:含有内含子A的重组表达质粒pCMV4.Ohsp65较之不含内含子A的pVAXlhsp65在293T。细胞中的抗原表达量更高,免疫小鼠后诱导产生的Anti-HSP65特异性总IgG和IgG2a抗体水平也更高,分泌IFN-Y的CD4+和CD8+T淋巴细胞频率增加,提示其诱导产生了增强的Th1型免疫应答反应。结论:内含子A可增强外源抗原在真核细胞中的表达效率并可提高DNA疫苗的免疫原性。
真核表达载体 内含子A DNA疫苗 免疫原性
吴娟 范小勇 马辉 曲勃 罗玉萍 Douglas B.Lowrie
330031 南昌,南吕大学生命科学与食品工程学院 201508 上海,复旦大学附属上海市公共卫生临床中心
国内会议
厦门
中文
280-291
2011-05-28(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)