猪转基因胚胎生产的策略与问题
借助转基因体细胞核移植(SCNT，也称克隆)及单精子胞浆内注射(ICSI)技术，可将具有抗PRRSV性能的候选基因通过重组与表达，生产出对病毒具有抵抗能力的转基因胚胎或后代，有助于培育特定的抗病猪群；但上述两种生产猪转基因胚胎的方法尚不完善，效率偏低。本文通过对前期研究结果的评价，通过构建具有PRRSV功能的shRNA质粒pEGFP-N1-shRNA，采用脂质体法将pEGFP-N1-shRNA质粒导入PK-15细胞中，G418筛选获得抗PRRSV转基因PK细胞系。转基因克隆采用转基因PK15细胞作供核细胞，注入体外成熟的去核卵母细胞卵周隙内，构建重构胚。最终获得5枚弱荧光转基因克隆桑椹胚，1枚强荧光ICSI 2细胞胚胎。指出，如何有效提高克隆效率、优化组合高技术程序并切实提高操作技能，是制约SCNT及ICSI技术发展的重要瓶颈，通过技术或理论创新突破这一制约瓶颈，业已成为一项急迫的新任务和新挑战。
抗病猪群 转基因胚胎 转基因体细胞核移植技术 单精子胞浆内注射技术 猪繁殖与呼吸综合征
张羽 罗碧平 剧世强 芮荣
南京农业大学动物医学院,江苏南京 210095
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2011-10-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）